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原理及适用范围 蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)在自然界分布广泛,在各种食品中的检出率也较高,往往是食品在食用前保存温度不当,放置时间过长,使污染在食品中的蜡样芽孢杆菌或残存的芽孢得以生长繁殖,或是由于含有蜡杆芽孢杆菌产生的热稳定毒素,而导致食物中毒的发生。中毒的发病率较高,一般为60-100%。蜡样芽孢杆菌食物中毒在临床上可分为呕吐型和腹泻型两类。呕吐型的潜伏期为0.5-6小时,中毒症状以恶心、呕吐为主,偶而有腹痉挛或腹泻等症状。腹泻型的潜伏期为6-15小时,症状以水泻、腹痉挛、腹痛为主,有时会有恶心等症状。蜡样芽孢杆菌测试片(BL210)培养显色就可确定出病原菌的存在与否,大大地简化了检测程序,对于提高细菌性食物中毒突发事件的反应能力具有重要的作用,同时也可在食品生产企业使用。 操作方法 样品处理:取样品25mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液。 接种:将蜡样芽孢杆菌测试片(BL210)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下,每个样品接种两片。 培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。 结果判读 对测试片进行观察,呈蓝绿色的菌落为蜡样芽孢杆菌。对于出现阳性菌落的样品,最好用其他方法作进一步的鉴定。 附加说明 1、本产品具有很好的特异性,接种蜡样芽孢杆菌纯菌株产生典型的蓝绿色点,而大部分非目标菌如大肠杆菌、大肠杆菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌和阪崎肠杆菌等均被抑制。 2、初步试验表明,蜡样芽孢杆菌测试片对纯菌的最低检测限为1cfu/mL。用蜡样芽孢杆菌测试片检测了23种食品样品,同时接种平皿做对比试验。测试片检出阳性样品7个,检出率为30.4%;用平皿法检出阳性样品6个,检出率为26.1%,测试片法比平皿法高了4.3%。 3、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。 保存条件 本品需存放在4~10℃冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。 |